应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » RT-PCR
171/2返回列表12下一页
查看: 959  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

亦木水

铜虫 (小有名气)

[交流] RT-PCR

从酵母提取RNA做RT-PCR，目的片段是2.5kb
现在将PCR结果上传，请帮我看看到底什么原因
最左边是Marker最右边的是RNA,中间的是PCR产物

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-1 at 13:18 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-03-12 00:22:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

亦木水

铜虫 (小有名气)
感觉最右端的不是RNA啊，虫友们怎么看
赞一下 回复此楼
2楼2009-03-12 00:23:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
★
亦木水(金币+1):谢谢参与
好多染料啊
回复此楼
金币是赌出来的
3楼2009-03-12 10:10:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子739

铁虫 (小有名气)
我提出的RNA的条带也比你的大不了多少，不知道这种现象是否真确？你的目的PCR条带出现了呀，只是条带较淡，可能是PCR条件不太合适。可以改进一下PCR条件，希望你能多交流RT-PCR
赞一下 回复此楼
4楼2009-03-16 16:37:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

亦木水

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 虫子739 at 2009-3-16 16:37:
我提出的RNA的条带也比你的大不了多少，不知道这种现象是否真确？你的目的PCR条带出现了呀，只是条带较淡，可能是PCR条件不太合适。可以改进一下PCR条件，希望你能多交流RT-PCR

我重复过，但一直就没重复出来，图上的结果太淡回收出来什么也没有。
估计还是RNA提的问题，我用的是Takara的isoregent提的，效果不咋的。
RT-PCR也是买的Takara的kit，里面的步骤和其他查的资料上有点不同，这个实验我已经忙了几个月了。。。
痛苦
赞一下 回复此楼
5楼2009-03-17 12:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子739

铁虫 (小有名气)
噢，我也做了一个多月了！老是会碰到一些棘手的问题！我用的也是Takara的RNAiso试剂，我说呢，怎么跟我提取的RNA条带相似，原来用的一个厂家的东西！每次5S 都比较亮。、
听说天根的RNA提取试剂盒不错，你要有条件试试，别忘了公布一下结果哦！
听说Takara的反转录酶可以，不用买试剂盒。我用的是天根的反转录试剂盒，我也还对此产品持着怀疑态度！
赞一下 回复此楼
6楼2009-03-18 12:13:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子739

铁虫 (小有名气)
建议你把条带淡的，做下二次PCR，看效果如何？关注着~祝你好运
赞一下 回复此楼
7楼2009-03-18 12:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangtengxu

木虫 (正式写手)
本人也在为RNA质量烦恼中
时好时不好
赞一下 回复此楼
想和有趣的人一起做有趣的事。
8楼2009-03-20 16:00:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
rna的质量做rtpcr足够了，pcr条带也出来了，我觉得pcr条件优化一下，或者用pcr产物当模板再做一轮pcr应该就行了

试剂方面还是trizol+SuperScript III最好
赞一下 回复此楼
9楼2009-03-20 17:12:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by jasco at 2009/3/20, 17:12:
试剂方面还是trizol+SuperScript III最好

支持，trizol是很经典很稳定的试剂
而SuperScript III则是目前世界上最好的逆转录酶，当然也很贵
如果负担不起可以考虑用invitrogen的M-MLV
赞一下 回复此楼
10楼2009-03-20 17:47:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 亦木水 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 275求调剂 +3 Micky11223 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:32 by barlinike
[考研] 309求调剂 +3 gajsj 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:01 by 无际的草原
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 081700 调剂 267分 +10 迷人的哈哈 2026-03-23 10/500 2026-03-25 12:12 by userper
[考研] 292求调剂 +4 鹅鹅鹅额额额额� 2026-03-24 4/200 2026-03-24 16:41 by peike
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap－ 2026-03-22 9/450 2026-03-23 12:57 by yqdszhdap－
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 考研调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭