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houge1160

禁虫 (初入文坛)
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1楼2018-01-31 08:21:54
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13678921003

新虫 (初入文坛)
★
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-02-02 04:27:31
先验证连接酶，可以买一些连接酶，感受态也要做一下对照，连接比例可以适当做一下梯度，最后就是菌落pcr了，可以用目的基因引物P一下

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5楼2018-02-01 15:41:23
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匿名

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-02-28 07:54:41
本帖仅楼主可见
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2楼2018-01-31 09:11:57
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书中日月长

新虫 (初入文坛)
会不会是感受态的问题？
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3楼2018-01-31 09:15:46
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)
可能性太多了。可以考虑丢给我连。。
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4楼2018-01-31 09:38:55
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houge1160

禁虫 (初入文坛)
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6楼2018-02-03 10:13:46
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书中日月长

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by houge1160 at 2018-02-03 10:13:46
什么意思？你怀疑感受态的活性？还是？...

如果菌液PCR没有带，可能是载体的问题或者感受态的问题，需要逐一排查。
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7楼2018-02-03 21:13:20
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ywnmn

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-02-28 07:54:26
PCT不出带，可以挑几个克隆提质粒跑电泳测大小，我之前做的也是阳性质粒P出条带，菌液就是不出，不知道问题出在哪，后来就提了好多质粒跑大小验证，大小对的再送测序

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8楼2018-02-04 07:20:47
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luck12345678

新虫 (小有名气)
酶切位点的事也会有影响，，

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9楼2018-02-28 06:49:28
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静待花开wz

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kangaroo0513 at 2018-01-31 09:38:55
可能性太多了。可以考虑丢给我连。。

你好，我酶切目的条带100多bp，跑电泳不显示条带怎么办，可以确定切开了，但小片段没有带。。。
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10楼2018-03-26 08:41:57
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