应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 请教各位老师，无缝连接的几个问题，谢谢
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2567  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

修晓飞

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教各位老师，无缝连接的几个问题，谢谢 已有2人参与

1.无缝连接中的片段和摩尔比是什么意思？怎样算？
2.无缝连接哪家的试剂盒比较好？
3.连接后转化DH5α中，有什么片段长度限制吗？
谢谢各位大神指点迷津

@biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2018-01-21 21:45:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15623507725

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我们都是用的NEB公司的。一般同源臂的长度我们都是取20bp。
赞一下 回复此楼
9楼2018-03-19 15:59:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

铁心考研

银虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-01-22 08:25:22
什么叫无缝连接？你是说T4 ligase催化的酶联反应吗？摩尔比指的是载体和片段的摩尔比，算法简单，说起来比较复杂，你就按照摩尔质量计算，核酸的平均相对分子质量用字母替代，后面就约掉了，但是要知道载体和片段的碱基数。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
我热爱自然科学！
2楼2018-01-21 22:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-01-22 08:25:34
1，摩尔比是有一个公式计算的，根据无缝克隆试剂盒知识的计算即可。2，像大公司的比如takara，天根都行，其中擎科生物技术公司产的相对性价比高，后续服务也可以。3，你在买之前可以咨询一下他们连接的片段长度问题。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2018-01-21 22:32:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
引用回帖:
2楼: Originally posted by 铁心考研 at 2018-01-21 22:05:31
什么叫无缝连接？你是说T4 ligase催化的酶联反应吗？摩尔比指的是载体和片段的摩尔比，算法简单，说起来比较复杂，你就按照摩尔质量计算，核酸的平均相对分子质量用字母替代，后面就约掉了，但是要知道载体和片段的 ...

他说的无缝克隆是Gibson组装

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2018-01-21 22:33:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 305求调剂 +8 RuiFairyrui 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:22 by fmesaito
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +11 Mr. Z 2026-03-25 11/550 2026-03-29 08:14 by 无际的草原
[考研] 0703化学 +11 妮妮ninicgb 2026-03-27 11/550 2026-03-29 06:45 by 544594351
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +4 小张zxy张 2026-03-26 8/400 2026-03-28 19:25 by lbsjt
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 4/200 2026-03-28 14:30 by QiMing7
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-27 5/250 2026-03-28 14:25 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工考研调剂 +17 孅華 2026-03-22 17/850 2026-03-28 08:35 by WYUMater
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 材料292调剂 +12 橘颂思美人 2026-03-23 12/600 2026-03-27 15:44 by caszguilin
[考研] 279 分 求调剂 +4 睡个好觉_16 2026-03-24 4/200 2026-03-27 15:05 by 醉在风里
[考研] 085600，材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +4 地球绕着太阳转 2026-03-23 4/200 2026-03-26 14:27 by zzll406
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap－ 2026-03-22 10/500 2026-03-26 13:11 by 公瑾逍遥
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭