24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2442  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

修晓飞

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教各位老师,无缝连接的几个问题,谢谢已有2人参与

1.无缝连接中的片段和摩尔比是什么意思?怎样算?
2.无缝连接哪家的试剂盒比较好?
3.连接后转化DH5α中,有什么片段长度限制吗?
谢谢各位大神指点迷津

@biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

修晓飞

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-01-21 22:32:47
1,摩尔比是有一个公式计算的,根据无缝克隆试剂盒知识的计算即可。2,像大公司的比如takara,天根都行,其中擎科生物技术公司产的相对性价比高,后续服务也可以。3,你在买之前可以咨询一下他们连接的片段长度问题 ...

用的NEB家的,感觉效果一般,可能也是我操作的问题……

发自小木虫IOS客户端
8楼2018-01-22 10:15:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

铁心考研

银虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-01-22 08:25:22
什么叫无缝连接?你是说T4 ligase催化的酶联反应吗?摩尔比指的是载体和片段的摩尔比,算法简单,说起来比较复杂,你就按照摩尔质量计算,核酸的平均相对分子质量用字母替代,后面就约掉了,但是要知道载体和片段的碱基数。

发自小木虫Android客户端
我热爱自然科学!
2楼2018-01-21 22:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-01-22 08:25:34
1,摩尔比是有一个公式计算的,根据无缝克隆试剂盒知识的计算即可。2,像大公司的比如takara,天根都行,其中擎科生物技术公司产的相对性价比高,后续服务也可以。3,你在买之前可以咨询一下他们连接的片段长度问题。

发自小木虫Android客户端
3楼2018-01-21 22:32:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

引用回帖:
2楼: Originally posted by 铁心考研 at 2018-01-21 22:05:31
什么叫无缝连接?你是说T4 ligase催化的酶联反应吗?摩尔比指的是载体和片段的摩尔比,算法简单,说起来比较复杂,你就按照摩尔质量计算,核酸的平均相对分子质量用字母替代,后面就约掉了,但是要知道载体和片段的 ...

他说的无缝克隆是Gibson组装

发自小木虫Android客户端
4楼2018-01-21 22:33:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见