应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 请教各位老师，无缝连接的几个问题，谢谢
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2564  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

修晓飞

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教各位老师，无缝连接的几个问题，谢谢 已有2人参与

1.无缝连接中的片段和摩尔比是什么意思？怎样算？
2.无缝连接哪家的试剂盒比较好？
3.连接后转化DH5α中，有什么片段长度限制吗？
谢谢各位大神指点迷津

@biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2018-01-21 21:45:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

修晓飞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by aishida at 2018-01-21 22:35:32
无缝连接用的比较多的是gibison assembly；摩尔数就是质量/（碱基对*650），比值你算一下就好了

做NEB的时候需要注意什么吗？老师

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2018-01-22 10:14:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

铁心考研

银虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-01-22 08:25:22
什么叫无缝连接？你是说T4 ligase催化的酶联反应吗？摩尔比指的是载体和片段的摩尔比，算法简单，说起来比较复杂，你就按照摩尔质量计算，核酸的平均相对分子质量用字母替代，后面就约掉了，但是要知道载体和片段的碱基数。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
我热爱自然科学！
2楼2018-01-21 22:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-01-22 08:25:34
1，摩尔比是有一个公式计算的，根据无缝克隆试剂盒知识的计算即可。2，像大公司的比如takara，天根都行，其中擎科生物技术公司产的相对性价比高，后续服务也可以。3，你在买之前可以咨询一下他们连接的片段长度问题。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2018-01-21 22:32:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
引用回帖:
2楼: Originally posted by 铁心考研 at 2018-01-21 22:05:31
什么叫无缝连接？你是说T4 ligase催化的酶联反应吗？摩尔比指的是载体和片段的摩尔比，算法简单，说起来比较复杂，你就按照摩尔质量计算，核酸的平均相对分子质量用字母替代，后面就约掉了，但是要知道载体和片段的 ...

他说的无缝克隆是Gibson组装

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2018-01-21 22:33:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 316求调剂 +7 江辞666 2026-03-26 7/350 2026-03-28 21:28 by sanrepian
[考研] 083000学硕274求调剂 +8 Li李鱼 2026-03-26 8/400 2026-03-28 20:33 by 加油向未来啊
[考研] 一志愿北京工业大学，324分求调剂 +4 零八# 2026-03-28 4/200 2026-03-28 15:01 by 17865157980
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 4/200 2026-03-28 14:30 by QiMing7
[考研] 0703一志愿9，初试成绩：338，四六级已过，有科研经历，求调剂！ +4 Zuhui0306 2026-03-25 4/200 2026-03-28 13:07 by 唐沐儿
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +6 脚滑的守法公民 2026-03-27 6/300 2026-03-28 11:02 by gjlllb
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 317求调剂 +7 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 7/350 2026-03-27 02:29 by fmesaito
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315（英一）求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap－ 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 289材料与化工（085600）B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 277分求调剂，跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭