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qPCR数据处理求助,神奇的让人头大的计算 已有1人参与
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求助。关于qPCR数据处理的问题。就是检测未处理组目的基因没信号,也就是不表达,经过分化处理后该基因表达,Ct值并且数值在35-38左右,计算相对表达量的时候怎么计算呢?未检测到信号的是按照最大循环数40来计算吗?可是如果这样的话,数据就上调倍数大的吓人,感觉统计的不科学,求数统高手指点? 发自小木虫Android客户端 |
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未检测到信号的必须重新做啊,而且ct值应该比较小才好,最好20左右。建议找些资料从原理到分析都好好看看 发自小木虫Android客户端 |
» 本帖已获得的红花(最新10朵)
2楼2017-12-06 14:52:17
hanxiaominhu
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【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
seanlee: 金币+30, ★★★★★最佳答案 2017-12-22 00:05:09
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做荧光定量PCR时。由于本身是一种PCR,所以循环数太晚的话,一般就不用了,不准了。35循环后起峰就算不能用了。你可以看看溶解曲线,估计不太好了吧。现在你需要坐的是检测一下内参基因有没有问题: 如果没有,那就看看目的基因的引物怎么样,别人做的怎么样;如果内参基因有问题,估计你前期操作有问题。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2017-12-06 16:20:08
4楼2017-12-22 00:06:14










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seanlee