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seanlee

新虫 (初入文坛)

[求助] qPCR数据处理求助,神奇的让人头大的计算已有1人参与

求助。关于qPCR数据处理的问题。就是检测未处理组目的基因没信号,也就是不表达,经过分化处理后该基因表达,Ct值并且数值在35-38左右,计算相对表达量的时候怎么计算呢?未检测到信号的是按照最大循环数40来计算吗?可是如果这样的话,数据就上调倍数大的吓人,感觉统计的不科学,求数统高手指点?

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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
seanlee: 金币+30, ★★★★★最佳答案 2017-12-22 00:05:09
做荧光定量PCR时。由于本身是一种PCR,所以循环数太晚的话,一般就不用了,不准了。35循环后起峰就算不能用了。你可以看看溶解曲线,估计不太好了吧。现在你需要坐的是检测一下内参基因有没有问题: 如果没有,那就看看目的基因的引物怎么样,别人做的怎么样;如果内参基因有问题,估计你前期操作有问题。

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3楼2017-12-06 16:20:08
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兰兰园丁

木虫 (著名写手)

未检测到信号的必须重新做啊,而且ct值应该比较小才好,最好20左右。建议找些资料从原理到分析都好好看看

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2017-12-06 14:52:17
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seanlee

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 兰兰园丁 at 2017-12-06 14:52:17
未检测到信号的必须重新做啊,而且ct值应该比较小才好,最好20左右。建议找些资料从原理到分析都好好看看

感谢解答

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4楼2017-12-22 00:06:14
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