| 查看: 1258 | 回复: 7 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
dulei木虫 (小有名气)
|
[交流]
DNA去磷酸化（CIAP）后怎么纯化？
|
||
|
我用的是CIAP碱性磷酸酶，照说明书的方法是这样的： 1、配制50uL反应体系。 2、37℃或50℃反应30分钟。 3、苯酚/氯仿/异戊醇（25 ：24 ：1）抽提2次。 4、氯仿/异戊醇（24 ：1）抽提1次。 5、添加5 μl的3 M NaOAC。 6、添加125 μl的（2.5倍量）冷乙醇，在-20℃下保冷30～60分钟。 7、离心分离回收沉淀，用200 μl的70％冷乙醇洗净后，减压干燥。 8、用20μl以下的TE Buffer溶解沉淀。 可是，第7步离心，不管怎么离心都得不到沉淀！！（我用13000r/min，离心20min）。 请问高手们都是怎么弄得？？希望给我个详细的步骤。谢谢！！ 另外，我想在37℃反应30分钟后，不用3—8步的方法进行纯化，而用纯化试剂盒（例如EZ-10 Spin Column DNA Gel Extraction Kit），可不可以？谢谢！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
国自然申请面上模板最新2026版出了吗？
已经有19人回复
-
拟解决的关键科学问题还要不要写
已经有7人回复
-
存款400万可以在学校里躺平吗
已经有17人回复
-
请教限项目规定
已经有3人回复
-
基金委咋了？2026年的指南还没有出来？
已经有10人回复
-
基金申报
已经有6人回复
-
推荐一本书
已经有13人回复
-
纳米粒子粒径的测量
已经有8人回复
-
疑惑？
已经有5人回复
-
计算机、0854电子信息（085401-058412）调剂
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
qingxiong
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2508.7
- 红花: 1
- 帖子: 415
- 在线: 240.6小时
- 虫号: 688246
- 注册: 2009-01-05
- 专业: 病原真菌学
4楼2009-02-26 13:53:42
zhaocy8903
木虫 (知名作家)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 3822.5
- 散金: 1238
- 红花: 17
- 帖子: 5798
- 在线: 1468.5小时
- 虫号: 636507
- 注册: 2008-10-25
- 专业: 微生物遗传育种学
2楼2009-02-26 10:28:57
5楼2009-02-26 15:11:27
guoqin_shiyin
银虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 0.4
- 散金: 57
- 红花: 3
- 帖子: 876
- 在线: 51.7小时
- 虫号: 163332
- 注册: 2006-01-11
- 性别: MM
- 专业: 微生物
6楼2009-02-26 16:23:12