24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4855)
>文献求助 (365)
>导师招生 (324)
>论文投稿 (318)
>博后之家 (258)
>虫友互识 (192)
>硕博家园 (106)
>考博 (99)
>有机交流 (89)
>学术会议 (80)
>招聘信息布告栏 (79)
>基金申请 (43)
>休闲灌水 (39)
>教师之家 (30)
>找工作 (28)
>考研 (26)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

贪恋尘世

新虫 (正式写手)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 760.3
帖子: 460
在线: 88.7小时
虫号: 4254595

[交流] 重组毕赤酵母菌落pcr条带不正确

前段时间电转质粒到毕赤酵母GS115后，平板上长了很多酵母菌，但是用目的基因特异性引物菌落pcr有条带，但是用载体两端通用引物只p出500bp的空载体片段，特别诡异，现在不知道我的质粒到底有没有转入酵母中，请各位大神指教，电泳图如下所示，左边是用目的基因特异性引物p的条带，大小也正确，右边是载体通用引物，只有500bp的空载片段。

发自小木虫IOS客户端

回复此楼

» 猜你喜欢

AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点已经有0人回复
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有282人回复
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？已经有0人回复
His标签蛋白纯化怎么才能快？已经有0人回复
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析已经有0人回复
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用已经有0人回复
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点已经有0人回复
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用已经有0人回复
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？已经有0人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2017-11-26 16:55:22

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

菜头Q

铜虫 (初入文坛)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 212.8
帖子: 45
在线: 26.3小时
虫号: 2874799

★
贪恋尘世(金币+1): 谢谢参与

我也刚开始做酵母转化。说说我自己的理解吧，不一定对，咱们互相交流一下。首先就是转化子做PCR鉴定，我觉得做菌落PCR不如做基因组PCR，酵母的外壁结构比大肠杆菌复杂得多，简单的煮沸很难裂解菌体，其他网上的方法我们试了效果也不理想，你的结果也许说明PCR的模板本身就是假阳性。其次就是你可以试试用一个目的产物扩增引物和一个载体测序引物作为PCR的引物对。