应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 毕赤酵母分泌表达蛋白，没加任何标签的纯化方法
51/1返回列表
查看: 1095  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zhaomsy

新虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母分泌表达蛋白，没加任何标签的纯化方法 已有1人参与

用毕赤酵母做的分泌型蛋白表达，目的蛋白的分子大小为6.5kD，当初设计的时候没有加his标签，求助用什么纯化方法进行纯化比较好？?因为需要尝蛋白所以需要纯化度好一点
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2017-11-16 13:05:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

renyanbin

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaomsy at 2017-11-24 21:03:51
目前做到阴离子交换，目的蛋白pI=5，想请教一下如何根据pI选择缓冲液和洗脱液呢...

缓冲液pH离PI远一些就可以，比如pH7.0/8.0的Tris，结合Buffer盐浓度20-50mM就可以，洗脱液可以先直接100%洗脱看看有没有条带，再优化。
赞一下 回复此楼
5楼2017-12-31 11:07:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

细胞资源

新虫 (初入文坛)
我也想知道

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
2楼2017-11-21 14:55:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhaomsy: 金币+5 2017-11-24 21:01:35
没有标签，分泌表达的，纯化也简单，先硫酸铵盐析，这个既可以浓缩也可以粗纯，然后盐析后的蛋白溶解后，过疏水层析，进一步纯化，纯化后纯度不够了，在继续过离子交换的，阴阳离子试验下那个更合适，过完纯度890%应该没问题了，还想继续纯化，在过排阻层析，用葡聚糖G75柱子。没标签就用疏水，离子，排阻，盐析的方式纯化啊，也简单。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2017-11-22 09:25:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaomsy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hc-material at 2017-11-22 09:25:30
没有标签，分泌表达的，纯化也简单，先硫酸铵盐析，这个既可以浓缩也可以粗纯，然后盐析后的蛋白溶解后，过疏水层析，进一步纯化，纯化后纯度不够了，在继续过离子交换的，阴阳离子试验下那个更合适，过完纯度890%应 ...

目前做到阴离子交换，目的蛋白pI=5，想请教一下如何根据pI选择缓冲液和洗脱液呢
赞一下 回复此楼
4楼2017-11-24 21:03:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +15 硕星赴 2026-03-23 15/750 2026-03-26 02:16 by BruceLiu320
[考研] 292求调剂 +7 鹅鹅鹅额额额额� 2026-03-25 8/400 2026-03-26 00:22 by Dyhoer
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 271求调剂 +4 生如夏花… 2026-03-22 4/200 2026-03-25 11:25 by userper
[考研] 287求调剂 +10 晨昏线与星海 2026-03-19 11/550 2026-03-25 10:35 by userper
[考研] 286求调剂 +11 Faune 2026-03-21 11/550 2026-03-25 10:11 by 雾散后相遇lc
[考研] 0703化学调剂，求导师收 +7 天天好运来上岸� 2026-03-24 7/350 2026-03-24 20:26 by peike
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭