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ocean_of_yu木虫 (正式写手)
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PEGFP-C1重组质粒转染细胞，G418筛选稳转细胞系遇到问题 已有4人参与
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我做真核（鱼细胞系转染PEGFP-C1的重组质粒）稳定表达，用G418筛选，之前做了预筛选实验，测出了G418的筛选浓度，大约是900ug/ml， 现在用这个浓度做筛选，1个星期过后，不亮荧光的这些细胞（理论上没有转进去重组质粒）只有少部分细胞死亡，而且状态也挺好的，增殖也较快（当然比未转染的要慢），后来我就逐渐增加G418的浓度，一直到1800ug/ml了，也对细胞没什么影响。对照组（未转染的CHO细胞），用1000ul/ml这个浓度，只过5天，所有对照都死亡了。 现在我真的不知道原因是什么，细胞就是不死，我如何筛选呢？ |
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2楼2017-11-08 16:15:35
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9楼2019-08-23 18:08:26