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ocean_of_yu木虫 (正式写手)
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PEGFP-C1重组质粒转染细胞,G418筛选稳转细胞系遇到问题已有4人参与
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我做真核(鱼细胞系转染PEGFP-C1的重组质粒)稳定表达,用G418筛选,之前做了预筛选实验,测出了G418的筛选浓度,大约是900ug/ml, 现在用这个浓度做筛选,1个星期过后,不亮荧光的这些细胞(理论上没有转进去重组质粒)只有少部分细胞死亡,而且状态也挺好的,增殖也较快(当然比未转染的要慢),后来我就逐渐增加G418的浓度,一直到1800ug/ml了,也对细胞没什么影响。对照组(未转染的CHO细胞),用1000ul/ml这个浓度,只过5天,所有对照都死亡了。 现在我真的不知道原因是什么,细胞就是不死,我如何筛选呢? |
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xuelong920
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3楼2017-11-11 04:44:01
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