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我叫崔温柔

新虫 (正式写手)

[求助] 求助,PEI转染悬浮细胞不成功,求帮助 已有3人参与

我用PEI转染悬浮293细胞
培养基用freestyle
转染前一天细胞计数1*10e6cells/ml,接种在125ml摇瓶中,总体积20ml
转染当天细胞密度为2*10e6cells/ml时转染,DNA、PEI分别用freestyle培养基稀释后,复合,静置10min后,加入到摇瓶中
转染48h后观察,没有荧光,一点儿都没有
希望有悬浮转染经验的虫友提供宝贵意见及建议
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buled

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ywwabc at 2017-11-08 09:16:00
我用PEI转染过293细胞,转染效率很高的,,但是我转染的细胞很少,只有10的六次方的样子,我当时是把细胞收集然后离心去上清加入总体积为300ul的无血清培养基和PEI复合物,置于EP管里培养箱静置4-6h后补液1.5ml完全 ...

请问你是加了多少质粒呢,跟PEI的比例是多少呢,谢谢

发自小木虫Android客户端
12楼2020-05-22 17:27:42
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