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cifer1230

金虫 (著名写手)


[交流] 提取的rna,和反转录都出现的怪状,不知原因

最近刚提取的rna ,并不是三条带,很奇怪,多条带,以为能用呢,后来就进行了反转录,跑pcr,内参居然出现两条带,甚是奇怪,求分析原因。我的反转录试剂换了,之前用的康为的,这次用的宝生物。也不应该是这个问题吧???

提取的rna,和反转录都出现的怪状,不知原因
rna1.png


提取的rna,和反转录都出现的怪状,不知原因-1
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提取的rna,和反转录都出现的怪状,不知原因-2
rna3.png


提取的rna,和反转录都出现的怪状,不知原因-3
内参1.png
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)



西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-11-03 07:47:31
染料不够,28S容易不出。另外有些提取试剂盒,会丢失5s。你这个marker多少的,对应先看看丢的是哪个

发自小木虫Android客户端
3楼2017-11-01 08:04:13
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)



西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-11-03 07:47:12
如果混入DNA多的话,DNA也作为模板扩增出带哦
8楼2017-11-02 15:48:31
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cosmos796

禁虫 (职业作家)


cifer1230(金币+1): 谢谢参与
本帖内容被屏蔽

14楼2017-12-22 18:58:50
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普通回帖

山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)



cifer1230(金币+1): 谢谢参与
是不是染料加的不够

发自小木虫Android客户端
2楼2017-11-01 08:01:30
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cifer1230

金虫 (著名写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 山舞银蛇 at 2017-11-01 08:01:30
是不是染料加的不够

我是用EB染得色
4楼2017-11-01 08:34:57
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cifer1230

金虫 (著名写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 山舞银蛇 at 2017-11-01 08:01:30
是不是染料加的不够

我是用EB染得色
5楼2017-11-01 08:35:03
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cifer1230

金虫 (著名写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 山舞银蛇 at 2017-11-01 08:04:13
染料不够,28S容易不出。另外有些提取试剂盒,会丢失5s。你这个marker多少的,对应先看看丢的是哪个

最后一张图是我做的pcr,我的内参,之前做的都是一条带,现在变成两条带,这整个过程就换了反转录的试剂盒,别的没换。
6楼2017-11-01 08:37:23
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)



cifer1230(金币+1): 谢谢参与
引物特异性行不行啊,内参基因是多拷贝。
7楼2017-11-02 15:46:41
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cifer1230

金虫 (著名写手)


引用回帖:
8楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-11-02 15:48:31
如果混入DNA多的话,DNA也作为模板扩增出带哦

是啊?您的意思是我的rna纯度不好
9楼2017-11-02 22:09:20
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)


引用回帖:
9楼: Originally posted by cifer1230 at 2017-11-02 22:09:20
是啊?您的意思是我的rna纯度不好...

是啊
10楼2017-11-02 23:14:37
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cifer1230(金币+1): 谢谢参与
请问你的RNA是提取的哪里的?用的什么试剂盒?
11楼2017-11-03 18:52:45
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请问你的RNA是提取的哪里的?用的什么试剂盒?
12楼2017-11-03 18:53:19
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cifer1230

金虫 (著名写手)


引用回帖:
12楼: Originally posted by 渊博震天 at 2017-11-03 18:53:19
请问你的RNA是提取的哪里的?用的什么试剂盒?

细胞的,宝生物的试剂

发自小木虫Android客户端
13楼2017-12-22 14:40:09
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cifer1230

金虫 (著名写手)


引用回帖:
14楼: Originally posted by cosmos796 at 2017-12-22 18:58:50
takara反转试剂047A我们常用,反转前要有除基因组步骤

我的就是去基因组的

发自小木虫Android客户端
15楼2018-01-27 08:20:18
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Korea??

新虫 (正式写手)



cifer1230(金币+1): 谢谢参与
你用的什么胶跑RNA?普通电泳么

发自小木虫IOS客户端
16楼2018-02-13 23:16:54
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Rieman

新虫 (正式写手)


17楼2018-03-25 14:32:28
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