| 查看: 1411 | 回复: 4 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
细菌DNA提取的方法 已有1人参与
|
||
|
请教一下各位大神，细菌DNA提取一般用什么方法？(不用试剂盒的情况下）(如果有真菌和放线菌的DNA提取方法就更好了)还有，GUTC缓冲液怎么配制呢？谢谢各位大神! 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
垃圾破二本职称评审标准
已经有19人回复
-
职称评审没过，求安慰
已经有53人回复
-
毕业后当辅导员了，天天各种学生超烦
已经有5人回复
-
26申博自荐
已经有3人回复
-
A期刊撤稿
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 菌种鉴定中细菌DNA提取这一步骤，通常用什么方法？
已经有24人回复
- 鱼病灶处细菌总DNA提取方法
已经有0人回复
- 溶菌酶和细菌DNA组提取方法
已经有0人回复
- 植物病原细菌DNA提取
已经有2人回复
- 一般的细菌DNA提取方法，会不会将样品中的病毒DNA提取出来？
已经有2人回复
- 氨氧化细菌DNA提取
已经有1人回复
- 细菌DNA提取
已经有9人回复
- 猪粪中细菌总DNA的提取
已经有15人回复
- 葛云英 土壤细菌DNA提取及多样性分析的T-RFLP方法
已经有1人回复
- 提取细菌DNA的时候用反复煮沸+冻融的方法可行吗？
已经有4人回复
- 环境样品地下水中细菌总DNA的提取方法
已经有23人回复
- 血液细菌DNA提取
已经有1人回复
- DNA的提取简介，包括法医DNA的提取方法！
已经有54人回复
- 求助DNA提取方法
已经有10人回复
- 细菌DNA提取裂解液的配制方法
已经有1人回复
KunnkA
金虫 (小有名气)
退堂鼓表演艺术家
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1694.7
- 红花: 1
- 帖子: 249
- 在线: 57.5小时
- 虫号: 3355030
- 注册: 2014-08-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
5楼2017-11-21 10:15:13
2楼2017-10-25 19:27:31
KunnkA
金虫 (小有名气)
退堂鼓表演艺术家
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1694.7
- 红花: 1
- 帖子: 249
- 在线: 57.5小时
- 虫号: 3355030
- 注册: 2014-08-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
snoopytbw: 金币+3, 有帮助 2017-11-20 15:01:40
snoopytbw: 金币+3, 有帮助 2017-11-20 15:01:40
|
如果是做普通的PCR检测 SDS法 提取DNA 就可以了。 (1)提取缓冲液 Tris-HCl 100mmol/L(pH8.0) EDTA 50mmol/L (pH8.0) NaCl 500 mmol/L (2)裂解液20%SDS (3)高盐溶液5mol/L KAc (4) RNaseA 10mg/ml (5) 异丙醇 (6)灭菌ddH2O或TE 方法 1取对数期生长细菌一毫升，移入离心管离心，细菌沉淀大小与绿豆粒相似即可，加有500μL提取液的离心管中,轻轻混匀。 2 向管中加入50μL20%SDS溶液，混匀，不可过于强烈震荡以防基因组DNA断裂 ，65℃保温10min，并不时摇动。 3 加入150μL 5mol/L KAc，混匀，置冰上20-30 min。 4 4℃,15 000rpm离心15min,转移上清到另一离心管中，加入0.7V的异丙醇，混匀，-20℃沉淀30 min 。 5 12 000rpm离心10min回收基因组DNA沉淀，吹干后加入适量的灭菌ddH2O或TE溶解DNA。 6 加入1/10体积的RNaseA，37℃保温20min，除去RNA。 7 CI抽提后，加2V乙醇，-20℃沉淀30 min 。12 000rpm离心10min回收基因组DNA沉淀。 8 用400μL 70%乙醇洗一次后，吹干，加入适量的灭菌ddH2O或TE溶解DNA。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
meyuexo3楼2017-10-28 11:30:26
4楼2017-11-20 14:04:56