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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 酶切后弥散
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a5255661

铜虫 (小有名气)

[交流] 酶切后弥散

重复了一个星期总是这样，酶切产物弥散，是什么原因？该怎么解决

酶切体系
buffer   3ul
质粒     9ul         浓度大约50-100ug/ml
酶        1+1ul
水        16ul
总        30ul

酶切后弥散
搜狗截图20171013153020.png
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1楼 2017-10-13 15:34:38
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ken19860823

木虫 (正式写手)
★
a5255661(金币+1): 谢谢参与
换个快切酶看看，很大可能是酶过期。

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3楼2017-10-13 16:47:41
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渡创

金虫 (小有名气)
★
a5255661(金币+1): 谢谢参与
质粒可能浓度太低了，建议用10μL的酶切体系，还有就是注意酶的buffer，希望对你有所帮助
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4楼2017-10-13 17:03:31
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a5255661

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ken19860823 at 2017-10-13 16:47:41
换个快切酶看看，很大可能是酶过期。

就是快切酶
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5楼2017-10-13 18:28:30
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小书生gg

新虫 (小有名气)
★
a5255661(金币+1): 谢谢参与
质粒浓度低

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6楼2017-10-13 19:19:45
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)
★
a5255661(金币+1): 谢谢参与
酶浓度可以降一点减半试试。

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8楼2017-10-15 10:14:22
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ZBCTOBE1

新虫 (小有名气)
★
a5255661(金币+1): 谢谢参与
图是怎么做的？

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10楼2017-11-05 10:21:51
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wuyiping

新虫 (初入文坛)
★
a5255661(金币+1): 谢谢参与
Marker跑得就不好，质粒浓度还行，但是跑的亮度不够，要么点样有问题，要么染色有问题。酶切体系应该有问题，质粒稀释后也不高，还不如直接5ul buffer+5ul质粒+2ul酶

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12楼2018-04-27 02:10:16
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hydzp2楼
2017-10-13 15:56   回复  
a5255661(金币+1): 谢谢参与
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nono20097楼
2017-10-14 09:44   回复  
a5255661(金币+1): 谢谢参与
sz_kebaoyuan9楼
2017-10-15 17:09   回复  
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学用思行11楼
2018-04-25 20:39   回复  
a5255661(金币+1): 谢谢参与
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