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阿玲哒

新虫 (正式写手)


已领完
合成的引物多长时间能降解
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我做重叠pcr基因敲除,需要扩增出左右同源臂之后再pcr,现在的情况是之前还能扩增出来,现在做了好几次了扩增不出来左右同源臂了,只有长长的拖尾,没有目的产物,模板DNA用细菌基因提取试剂盒重新提取了还是不可以,buffer也换过了,琼脂也重新配应该没问题,pfu应该也没问题,也都混匀了,退火温度是之前用的最合适的退火温度,现在是不是只剩下引物的问题了,怎么看引物降没降解,降解的话是不是需要重新设计引物

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山还在那儿

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引物很稳定,我试过4度放几个月,-20度放一两年也没问题!

祝好!
12楼2017-10-11 11:37:26
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阿玲哒

新虫 (正式写手)


引用回帖:
12楼: Originally posted by 山还在那儿 at 2017-10-11 11:37:26
引物很稳定,我试过4度放几个月,-20度放一两年也没问题!

祝好!

我2OD都溶解了  反复冻融过几次

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13楼2017-10-11 11:49:15
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山还在那儿

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by 阿玲哒 at 2017-10-11 11:49:15
我2OD都溶解了  反复冻融过几次
...

你是不是吸取引物的时候没换枪头,引物污染,把引物降解了?
14楼2017-10-11 12:24:06
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阿玲哒

新虫 (正式写手)


引用回帖:
14楼: Originally posted by 山还在那儿 at 2017-10-11 12:24:06
你是不是吸取引物的时候没换枪头,引物污染,把引物降解了?...

我每次吸引物都会换枪头  引物是稀释之后分装的  枪头是灭过菌的  可能有其他途径把它污染了吧   哎 惆怅

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15楼2017-10-11 12:34:01
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山还在那儿

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by 阿玲哒 at 2017-10-11 12:34:01
我每次吸引物都会换枪头  引物是稀释之后分装的  枪头是灭过菌的  可能有其他途径把它污染了吧   哎 惆怅
...

你可以重新合成或者换个合成厂家试试
16楼2017-10-12 09:23:07
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阿玲哒

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引用回帖:
16楼: Originally posted by 山还在那儿 at 2017-10-12 09:23:07
你可以重新合成或者换个合成厂家试试...

嗯 好的   谢谢

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17楼2017-10-12 09:34:42
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xuyuzhi

新虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
重合就好,4度大概2-3月

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18楼2017-10-23 12:52:40
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pandongzi2楼
2017-10-11 10:06   回复  
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4182362853楼
2017-10-11 10:06   回复  
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dongmings9楼
2017-10-11 10:08   回复  
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T_Y_M10楼
2017-10-11 10:08   回复  
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