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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 合成的引物多长时间能降解
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阿玲哒

新虫 (正式写手)
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合成的引物多长时间能降解
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我做重叠pcr基因敲除，需要扩增出左右同源臂之后再pcr，现在的情况是之前还能扩增出来，现在做了好几次了扩增不出来左右同源臂了，只有长长的拖尾，没有目的产物，模板DNA用细菌基因提取试剂盒重新提取了还是不可以，buffer也换过了，琼脂也重新配应该没问题，pfu应该也没问题，也都混匀了，退火温度是之前用的最合适的退火温度，现在是不是只剩下引物的问题了，怎么看引物降没降解，降解的话是不是需要重新设计引物

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1楼 2017-10-11 10:05:45
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山还在那儿

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引物很稳定，我试过4度放几个月，-20度放一两年也没问题！

祝好！
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12楼2017-10-11 11:37:26
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阿玲哒

新虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 山还在那儿 at 2017-10-11 11:37:26
引物很稳定，我试过4度放几个月，-20度放一两年也没问题！

祝好！

我2OD都溶解了  反复冻融过几次

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13楼2017-10-11 11:49:15
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山还在那儿

银虫 (小有名气)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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13楼: Originally posted by 阿玲哒 at 2017-10-11 11:49:15
我2OD都溶解了  反复冻融过几次
...

你是不是吸取引物的时候没换枪头，引物污染，把引物降解了？
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14楼2017-10-11 12:24:06
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阿玲哒

新虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 山还在那儿 at 2017-10-11 12:24:06
你是不是吸取引物的时候没换枪头，引物污染，把引物降解了？...

我每次吸引物都会换枪头  引物是稀释之后分装的  枪头是灭过菌的  可能有其他途径把它污染了吧   哎 惆怅

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15楼2017-10-11 12:34:01
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山还在那儿

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by 阿玲哒 at 2017-10-11 12:34:01
我每次吸引物都会换枪头  引物是稀释之后分装的  枪头是灭过菌的  可能有其他途径把它污染了吧   哎 惆怅
...

你可以重新合成或者换个合成厂家试试
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16楼2017-10-12 09:23:07
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阿玲哒

新虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 山还在那儿 at 2017-10-12 09:23:07
你可以重新合成或者换个合成厂家试试...

嗯 好的   谢谢

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17楼2017-10-12 09:34:42
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xuyuzhi

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
重合就好，4度大概2-3月

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18楼2017-10-23 12:52:40
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pandongzi2楼
2017-10-11 10:06   回复  
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4182362853楼
2017-10-11 10:06   回复  
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高等有机4楼
2017-10-11 10:07   回复  
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chengsi94065楼
2017-10-11 10:07   回复  
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翻译润色论文6楼
2017-10-11 10:07   回复  
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tql199408107楼
2017-10-11 10:08   回复  
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188740163248楼
2017-10-11 10:08   回复  
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dongmings9楼
2017-10-11 10:08   回复  
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T_Y_M10楼
2017-10-11 10:08   回复  
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陆星材lxc11楼
2017-10-11 10:09   回复  
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