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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » DNA提取总出现拖尾
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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新虫 (小有名气)

[求助] DNA提取总出现拖尾 已有1人参与

DNA提取第一次跑胶总拖尾，损失很多，大家有什么好的提DNA的方法吗？求推荐

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1楼 2017-10-09 11:17:58
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cc3135526

银虫 (正式写手)
试试不同的试剂盒~~，
欢迎咨询我们~
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2楼2017-10-09 13:20:36
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635270fmaifx

铜虫 (初入文坛)
化学方法提取，经典方法ctab法比试剂盒提取效果更好，

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3楼2017-10-09 13:46:08
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1203227264

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 635270fmaifx at 2017-10-09 13:46:08
化学方法提取，经典方法ctab法比试剂盒提取效果更好，

嗯嗯，我试试

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4楼2017-10-09 14:09:24
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
原因有以下：
1、 可以考虑是不是样品不纯，目的产物与杂带相差不大，所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。
2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液，加2微升溴酚蓝便可，注意上样浓度；
3、可能是原液浓度太大造成的；
4、可能DNA已降解。
5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENP buffer，文献中查的到的。
6、 DNA降解避免核酸酶污染。
7、 DNA上样量过多，可以减少凝胶中DNA上样量。
8、 所用电泳条件不合适，可以将电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃,巨大DNA链，温度应   ＜15℃，核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。
9、 DNA样含盐过高，可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。
10、 有蛋白污染，可以采用电泳前酚抽提去除蛋白。
11、 DNA变性，电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA
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及时行乐，人生不留遗憾！
5楼2017-10-09 21:25:25
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didongwei

金虫 (著名写手)
如果只是做模板，这个无所谓的。还有，你是提什么样品的DNA？方法是不一样的

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不是优秀，而是不可替代
6楼2017-10-09 22:57:59
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小小竹叶

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by didongwei at 2017-10-09 22:57:59
如果只是做模板，这个无所谓的。还有，你是提什么样品的DNA？方法是不一样的

我提的这样的DNA，要是以这第三个跟第四个为模板pcr提5SrDNA可以吗？
DNA提取总出现拖尾



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7楼2017-12-08 20:22:37
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1203227264

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by didongwei at 2017-10-09 22:57:59
如果只是做模板，这个无所谓的。还有，你是提什么样品的DNA？方法是不一样的

提样品的DNA，对样品要求很高

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8楼2018-03-29 16:19:37
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