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DNA提取总出现拖尾 已有1人参与
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DNA提取第一次跑胶总拖尾，损失很多，大家有什么好的提DNA的方法吗？求推荐 发自小木虫Android客户端 |
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4楼2017-10-09 14:09:24
2楼2017-10-09 13:20:36
635270fmaifx
铜虫 (初入文坛)
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3楼2017-10-09 13:46:08
晋鹏
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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原因有以下： 1、 可以考虑是不是样品不纯，目的产物与杂带相差不大，所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。 2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液，加2微升溴酚蓝便可，注意上样浓度； 3、可能是原液浓度太大造成的； 4、可能DNA已降解。 5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENP buffer，文献中查的到的。 6、 DNA降解避免核酸酶污染。 7、 DNA上样量过多，可以减少凝胶中DNA上样量。 8、 所用电泳条件不合适，可以将电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃,巨大DNA链，温度应 ＜15℃，核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。 9、 DNA样含盐过高，可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。 10、 有蛋白污染，可以采用电泳前酚抽提去除蛋白。 11、 DNA变性，电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA |
5楼2017-10-09 21:25:25
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