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低丰度基因克隆求助
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各位高手大家好,本人现预克隆一在其他物种中保守性非常强的基因,且能保证在我提取RNA的物种中存在该基因,克隆策略为提取总RNA,反转录后采用兼并引物进行克隆,但该基因丰度很低,经多次尝试均未PCR出该基因的片段,为此向各位请教针对低丰度基因克隆,有什么策略?在该基因克隆试验中应该注意什么事项,即哪地方容易出现问题?? 多谢指点! |
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