| 查看: 976 | 回复: 1 | ||
碇元渡至尊木虫 (著名写手)
|
[求助]
求助RT-PCR引物验证的方法 已有1人参与
|
| 本人要做干细胞成脂分化的实验，,相通过RT-PCR的方法检测分化后的细胞中目的基因的表达量。订购了RT-PCR要用的内参引物和目的基因引物，但刚刚接触RT-PCR，不知道怎么验证内参引物好用不好用，需要看哪些参数，比如熔解曲线之类。烦请大家提供一下粗略的方案、方法。 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有159人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
碇元渡: 金币+100, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2017-10-03 09:41:17
感谢参与，应助指数 +1
碇元渡: 金币+100, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2017-10-03 09:41:17
|
验证RT-PCR体系（引物）好坏，一般通过标准曲线验证： 1.RT-PCR曲线应顺滑，拐点清楚，基线期，指数期，平台期三期明显； 2.扩增效率应在90%-110%之间； 3.如果是染料法，溶解曲线仅有一个主峰；’ 4.NTC不加模板的对照应无扩增曲线，或者扩增曲线起峰时间大于35个循环； 如有其它问题，欢迎及时沟通，祝实验顺利！ |
2楼2017-09-30 14:07:06