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感觉要延期哎

新虫 (小有名气)

[交流] rna提取,浓度和260/280比值都很好,但是跑胶结果不好 已有14人参与

右一是我提的豆子的rna,右二和右三是拟南芥的rna,这样看,我的rna是不是降解了?用它反转录的cDNA也不是很好,前三个数据依次是豆子,两个拟南芥的rna数据,后边三个是对应的反转录之后的cDNA数据,请大家帮忙分析一下,我后续要p条带,影响大么?

rna提取,浓度和260/280比值都很好,但是跑胶结果不好


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极北小白熊

铁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
比值看的是纯度,跑胶看的是浓度和完整性

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3楼2017-09-25 21:24:17
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-26 07:47:18
首先,同学,电泳图你放置倒了。
其次,如楼上所说样品右二和右三电泳图看RNA质量还算可以,样品右一看着降解严重,但是既然都做了,那就三个一起反转录看看吧。兴许可以呢

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8楼2017-09-25 22:44:08
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感觉要延期哎

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 感觉要延期哎 at 2017-09-26 09:37:01

不知道是不是上样多了,我又多跑了一段时间,跑开了反而能看到多一点18s和28s.谢谢大家,我老师就我一个学生,他也处于啥都不懂的情况,所以有问题只能求助大家

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11楼2017-09-26 09:38:36
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绿色心情cc

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-26 07:46:58
右一降解比较严重,右二右三还可以。扩增条带应该都可以。不放心反转后用内参扩增一下cDNA。cDNA是不能直接测定浓度的,反转体系中有其他成分会干扰测定。

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4楼2017-09-25 21:47:12
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mlxmiao

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
M都跑成这样子!说明制胶和电泳需要提高。样品上的多了也跑不好。不过第一个样品太差了,估计不能用。

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7楼2017-09-25 22:35:04
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极北小白熊

铁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 感觉要延期哎 at 2017-09-25 22:03:47
嗯嗯,但是图里18s.28s还是隐约可见的,pcr应该是可以的吧
...

只是浓度略差,常规pcr没问题

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9楼2017-09-26 00:11:55
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走着走着ZZ

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 感觉要延期哎 at 2017-09-25 22:02:37
因为我这个豆子的材料研究的很少,所以我没有内参可以用明天直接尝试p条带吧
...

也可以从相似物种找内参

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12楼2017-09-27 09:42:23
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yufeiwaner

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
内容已删除
16楼2017-12-11 17:37:28
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普通回帖

感觉要延期哎

新虫 (小有名气)

2楼2017-09-25 21:21:37
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感觉要延期哎

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 绿色心情cc at 2017-09-25 21:47:12
右一降解比较严重,右二右三还可以。扩增条带应该都可以。不放心反转后用内参扩增一下cDNA。cDNA是不能直接测定浓度的,反转体系中有其他成分会干扰测定。

因为我这个豆子的材料研究的很少,所以我没有内参可以用明天直接尝试p条带吧

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5楼2017-09-25 22:02:37
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感觉要延期哎

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 极北小白熊 at 2017-09-25 21:24:17
比值看的是纯度,跑胶看的是浓度和完整性

嗯嗯,但是图里18s.28s还是隐约可见的,pcr应该是可以的吧

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6楼2017-09-25 22:03:47
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感觉要延期哎

新虫 (小有名气)

10楼2017-09-26 09:37:01
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