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mfl梅凤玲

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-01-09 21:43:16
实验步骤没什么大问题,如果建议换感受态试试,你的质粒是用Nanodrop测的浓度吗?峰型怎么样,如果换感受态还是没有效果就可能是质粒的问题,建议重新提质粒
11楼2017-09-29 09:12:47
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ytt1109

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 药娘子 at 2017-09-22 09:13:06
感受态细胞保存于-80℃,一般来说,50微升感受态细胞不是对应50-100ng的质粒吗?
...

正常情况下质粒加多了只会引起长的菌斑密度增加,不会不长菌,所以感受态失活的可能行比较大吧,换一下感受态吧,我最近做转化老不长菌,换了感受态就解决了哈。
好好学习,天天向上。
12楼2017-11-04 22:06:48
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lemon201399

新虫 (初入文坛)

有可能是感受态的菌株系有问题,重新换一个株系做感受太试试

发自小木虫Android客户端
13楼2018-01-03 09:19:07
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思之诚之

新虫 (正式写手)

初看后,两个建议:一是质粒浓度有点低,一般地,最少也有好几十纳克每微升,你可以考虑重提质粒;二是,可能这一批感受态有问题,不好;三是,其它不明原因,生物实验就是这样,如果不能反思出明显出错的地方,建议还是认真严谨地再重做,不要纠结于失败原因,因为很多永远也搞不清楚的。祝好!

发自小木虫Android客户端
14楼2018-01-05 00:10:09
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水逝雁南飞

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

质粒鉴定过嘛~建议鉴定一下质粒

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15楼2018-01-09 21:33:33
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superbadone

新虫 (初入文坛)

与质粒多少关系不大,抗性对的话,做阳转一试就知道质粒的问题还是感受态问题了

发自小木虫IOS客户端
16楼2018-01-31 21:38:43
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凌霄冻

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

存在两个问题,1.载体和目的片段的比例一般为1:3,你的质粒的浓度是13.7ng,那目的基因应该在40ng以上。
                        2.在涂板子的时候,涂布棒一定要冷却,不然全烫死了。
17楼2018-02-07 11:34:10
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