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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 蛋白一直跑不动
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lvlv大侠

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白一直跑不动

新手第一次做蛋白电泳，分离胶10％，浓缩胶5％，开始电压是80v，但是电流只有几毫安
求助各位找找原因

蛋白一直跑不动


@gyesang 发自小木虫Android客户端
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1楼 2017-09-19 08:29:03
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dongdy08

银虫 (初入文坛)
检查一下电泳液？

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2楼2017-09-19 08:31:47
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lvlv大侠

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dongdy08 at 2017-09-19 08:31:47
检查一下电泳液？

电泳液用的5*Tris-glycine buffer，是不是需要用超纯水配制

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3楼2017-09-19 08:35:09
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沉默、颜泪

木虫 (正式写手)
1、胶板一定要组装好，缓冲液在小槽中加满。仪器接通电源，如果电泳槽有气泡，表明仪器是好的。2、针对你的Running Buffer ，建议使用新的药品配制;3、如果还不行，更换配胶的试剂。

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4楼2017-09-19 08:36:05
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lvlv大侠

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 沉默、颜泪 at 2017-09-19 08:36:05
1、胶板一定要组装好，缓冲液在小槽中加满。仪器接通电源，如果电泳槽有气泡，表明仪器是好的。2、针对你的Running Buffer ，建议使用新的药品配制;3、如果还不行，更换配胶的试剂。
...

好的，跑蛋白的时候底板上的气泡量很少，但是电流只要多一点气泡量也会变多，我配一个新的缓冲液看看，谢谢啦

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5楼2017-09-19 08:48:29
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本科生再去

新虫 (初入文坛)
双蒸水就可以啊

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6楼2017-09-27 23:36:01
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名字的魅力

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lvlv大侠 at 2017-09-19 08:35:09
电泳液用的5*Tris-glycine buffer，是不是需要用超纯水配制
...

不应该用1?的吗

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7楼2017-10-07 20:41:27
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自带光环?

新虫 (初入文坛)
哈哈哈，会不会是内外槽装反了。我也是最近刚学，装反了一直跑不动。

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8楼2017-10-09 19:30:42
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SorryJ

银虫 (小有名气)
电流几毫安可能有问题了，你确定表上的电压能够达到80V么？

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9楼2017-10-12 17:12:02
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哥就不能忍了

新虫 (初入文坛)
lz你的胶板放反了，凹槽玻璃面放里侧，完全玻璃面放外面。内槽的电泳液要没过你的点样槽，加样的时候要慢点加防止样品溢出点样槽。

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10楼2017-10-20 22:04:24
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