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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 绝对定量PCR 扩增效率
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欧欧0139

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绝对定量PCR 扩增效率
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绝对定量PCR的扩增效率要达到多少呢？看有的说要90%-110%，有的说是相对定量的扩增效率是90%-110%，可是我现在斜率都在-4.0左右，斜率大概75%，试了降低退火温度，提高复性和延伸时间，还提高了引物浓度，建标曲的时候不同浓度的模板Ct值整体降低，但是delta Ct值没啥变化，相当于我的标曲斜率没啥变化。
       问题1：为什么我尝试的提高扩增效率的方法，可是delta Ct没啥变化呢？是我理解错它们之间的关系了吗
     问题2：还想问下小伙伴儿们做qPCR的时候低浓度模板和阴性的重现性不好，遇到这种问题大家都是怎么解决的呢？
请求各位大神们多多指教啦～

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1楼 2017-09-12 21:13:53
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文人相轻2楼
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youku_zhc13楼
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emu_yu4楼
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giselle1185楼
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月白风清画6楼
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dongmings7楼
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万邦翻译8楼
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狗屎运9楼
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yuejihua11楼
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dsctg12楼
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巨噬细胞13楼
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cxy331114楼
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skhonor11515楼
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Thomas_Lo16楼
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wxiaona17楼
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Materials18楼
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学海无涯洲19楼
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dicpd20楼
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fptony21楼
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pandongzi22楼
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seuwater24楼
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SwainMVP25楼
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BraveSophia26楼
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nono200927楼
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不闹的闹闹30楼
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dlli201431楼
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wangqxmc32楼
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aishida33楼
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Andy三木五岳34楼
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helen_201135楼
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来啊，学习36楼
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tiger虎虎虎37楼
2017-11-22 15:07   回复  
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