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PCR反应条件的改进，求大牛 已有4人参与
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如题，我在做两个种属的目的片段扩增，分别是大鼠和人的。 目的片段在最上面第一条marker的附近，大概2kb的大小 反应程序如下： 98度 10min 98度 30s 58or62度 30s 68度 1kb/min 30-35cycle 68度 10min PCR用的是Takara的primerstar高保真酶 图一退火温度是62度，引物Tm69度左右 图二退火温度是58度，引物Tm64度左右 引物Tm值都是算上酶切位点的 觉得目的条带太暗了，特别是图片上左边的条带，胶回收后浓度只有20多ng/ul，有什么条件可以改进的吗？求建议！谢谢大家！   用的是cDNA做模板进行PCR扩增 |
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2楼2017-09-11 00:24:28
domopal
铁杆木虫 (正式写手)
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3楼2017-09-11 08:42:03
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5楼2017-09-11 11:29:12