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我在你在木虫 (初入文坛)
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做WB时actin总不出,有时候需要孵育两遍,目的蛋白也是,怎么解决 已有5人参与
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做western时,内参actin经常性不出,改变抗体浓度也试过 ,依旧不出,目的蛋白出的也不好,不知道什么原因,经常需要孵育两遍,最近一次做孵育两遍依旧无actin,崩溃中,还有做wb前要测蛋白浓度么 ,蛋白浓度范围在多少才合适,我之前测在30ug/ml左右,应该不低吧。求大神指教。 |
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2楼2017-09-10 10:38:20
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需要测蛋白浓度,30ug/ml的浓度太低了,上样量每孔需要10ug以上,所以样品浓度起码得0.5mg/ml以上了 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2017-09-10 11:36:24
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上样量增加一倍 actin浓度上调 抗体是国外的么 把批号以及包装信息写邮件发过去 也有可能是国内小作坊套牌假抗体 发自小木虫IOS客户端 |

4楼2017-09-10 11:40:13
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