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[求助]PCR之后电泳,胶上空白
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大家好…… 我现在在做PCR相关的内容,但是大多数的模板无论如何都跑不出结果(琼脂糖电泳后,胶上完全是空白),各种Mg2+浓度和退火温度都试过 一个奇怪的问题就是在另外的实验室请他们帮忙做梯度(我们这里做不了梯度PCR),各种退火温度和体系 最后电泳都能跑出条带,只是明亮度不同而已 回到自己这边就无论如何都做不出来~(但是不是全部,有少量的模板几乎每次pcr都能成功) 相关的内容:pcr仪不知道是什么牌子,是那种很小的,25*0.2ml,前面板是一个倾斜度很大的斜面 酶有 鼎国/博士德/Fermentas,都试过,在自己这里都跑不出结果 需要扩增的内容有100+bp的,也有600bp左右的,几乎每次都能扩出来的是全长…… 引物应该没有问题,在别的实验室都可以做出来 大概情况就是这样,哪位熟悉这方面的师兄师姐能帮我看看? 感激不尽!! [ Last edited by 350784478 on 2009-10-19 at 12:40 ] |
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4楼2009-02-12 21:49:55
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难道PCR仪挂了?你试过用这个PCR扩出东西来没?