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windymoon6355

应助: (幼儿园)
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[交流] [求助]PCR之后电泳，胶上空白

大家好……
我现在在做PCR相关的内容，但是大多数的模板无论如何都跑不出结果（琼脂糖电泳后，胶上完全是空白），各种Mg2+浓度和退火温度都试过
一个奇怪的问题就是在另外的实验室请他们帮忙做梯度（我们这里做不了梯度PCR），各种退火温度和体系最后电泳都能跑出条带，只是明亮度不同而已
回到自己这边就无论如何都做不出来~（但是不是全部，有少量的模板几乎每次pcr都能成功）

相关的内容：pcr仪不知道是什么牌子，是那种很小的，25*0.2ml，前面板是一个倾斜度很大的斜面
酶有鼎国/博士德/Fermentas，都试过，在自己这里都跑不出结果
需要扩增的内容有100+bp的，也有600bp左右的，几乎每次都能扩出来的是全长……
引物应该没有问题，在别的实验室都可以做出来

大概情况就是这样，哪位熟悉这方面的师兄师姐能帮我看看？
感激不尽！！

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-19 at 12:40 ]

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