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生物小学弟

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[求助] 关于siRNA转染293T细胞已有1人参与

请问，转染时，所用的DMEM培养液能否含有血清？我知道不能含有双抗，但是血清能不能加我不知道！还请大神们不吝赐教，谢谢。

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1楼 2017-09-01 09:26:05

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生物小学弟

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我做的是si RNA与重组质粒共转染293T细胞，来看siRNA对重组质粒表达的影响。

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2楼2017-09-01 09:30:56

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yun920228

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都要啊，不然细胞怎么生长

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3楼2017-09-01 09:37:57

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yun920228

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24h不加双抗，后面换成正常培养基

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4楼2017-09-01 09:38:26

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婷婷贝贝

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要看你转染试剂的说明书。很早的说明书说，转盘之前一个小时换不带血清的培养基，然后进行转染，转染6-8小时后，换为正常培养基，但是现在的lipo2000和

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5楼2017-09-01 09:48:33

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婷婷贝贝

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3000都说不用换不带血清的培养基。但是我们有时候为了转染效率高，细胞还皮实的话，就换不带血清的培养基，转染后8小时换液。

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6楼2017-09-01 09:49:30

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genhunter

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

转染时不加，之后用常规的

离成功还差一点

7楼2017-09-01 09:50:51

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生物小学弟

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6楼: Originally posted by 婷婷贝贝 at 2017-09-01 09:49:30
3000都说不用换不带血清的培养基。但是我们有时候为了转染效率高，细胞还皮实的话，就换不带血清的培养基，转染后8小时换液。

那你们转染的96孔板吗？为什么我换液的时候，会换没好多的细胞呀？

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8楼2017-09-01 10:07:01

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4楼: Originally posted by yun920228 at 2017-09-01 09:38:26
24h不加双抗，后面换成正常培养基

谢谢

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9楼2017-09-01 10:07:47

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6楼: Originally posted by 婷婷贝贝 at 2017-09-01 09:49:30
3000都说不用换不带血清的培养基。但是我们有时候为了转染效率高，细胞还皮实的话，就换不带血清的培养基，转染后8小时换液。

请问你们有出现这样的情况吗？

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10楼2017-09-01 10:08:31

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