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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 关于siRNA转染293T细胞
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生物小学弟

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于siRNA转染293T细胞 已有1人参与

请问，转染时，所用的DMEM培养液能否含有血清？我知道不能含有双抗，但是血清能不能加我不知道！还请大神们不吝赐教，谢谢。

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1楼 2017-09-01 09:26:05
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生物小学弟

新虫 (初入文坛)
我做的是si RNA与重组质粒共转染293T细胞，来看siRNA对重组质粒表达的影响。

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2楼2017-09-01 09:30:56
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yun920228

铁杆木虫 (小有名气)
都要啊，不然细胞怎么生长

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3楼2017-09-01 09:37:57
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yun920228

铁杆木虫 (小有名气)
24h不加双抗，后面换成正常培养基

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4楼2017-09-01 09:38:26
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婷婷贝贝

新虫 (著名写手)
要看你转染试剂的说明书。很早的说明书说，转盘之前一个小时换不带血清的培养基，然后进行转染，转染6-8小时后，换为正常培养基，但是现在的lipo2000和

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5楼2017-09-01 09:48:33
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婷婷贝贝

新虫 (著名写手)
3000都说不用换不带血清的培养基。但是我们有时候为了转染效率高，细胞还皮实的话，就换不带血清的培养基，转染后8小时换液。

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6楼2017-09-01 09:49:30
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genhunter

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
转染时不加，之后用常规的
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离成功还差一点
7楼2017-09-01 09:50:51
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生物小学弟

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 婷婷贝贝 at 2017-09-01 09:49:30
3000都说不用换不带血清的培养基。但是我们有时候为了转染效率高，细胞还皮实的话，就换不带血清的培养基，转染后8小时换液。

那你们转染的96孔板吗？为什么我换液的时候，会换没好多的细胞呀？

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8楼2017-09-01 10:07:01
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生物小学弟

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yun920228 at 2017-09-01 09:38:26
24h不加双抗，后面换成正常培养基

谢谢

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9楼2017-09-01 10:07:47
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生物小学弟

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 婷婷贝贝 at 2017-09-01 09:49:30
3000都说不用换不带血清的培养基。但是我们有时候为了转染效率高，细胞还皮实的话，就换不带血清的培养基，转染后8小时换液。

请问你们有出现这样的情况吗？

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10楼2017-09-01 10:08:31
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