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生物小学弟

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于siRNA转染293T细胞已有1人参与

请问,转染时,所用的DMEM培养液能否含有血清?我知道不能含有双抗,但是血清能不能加我不知道!还请大神们不吝赐教,谢谢。

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生物小学弟

新虫 (初入文坛)

我做的是si RNA与重组质粒共转染293T细胞,来看siRNA对重组质粒表达的影响。

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2楼2017-09-01 09:30:56
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yun920228

铁杆木虫 (小有名气)

都要啊,不然细胞怎么生长

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3楼2017-09-01 09:37:57
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yun920228

铁杆木虫 (小有名气)

24h不加双抗,后面换成正常培养基

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4楼2017-09-01 09:38:26
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婷婷贝贝

新虫 (著名写手)

要看你转染试剂的说明书。很早的说明书说,转盘之前一个小时换不带血清的培养基,然后进行转染,转染6-8小时后,换为正常培养基,但是现在的lipo2000和

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5楼2017-09-01 09:48:33
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婷婷贝贝

新虫 (著名写手)

3000都说不用换不带血清的培养基。但是我们有时候为了转染效率高,细胞还皮实的话,就换不带血清的培养基,转染后8小时换液。

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6楼2017-09-01 09:49:30
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genhunter

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
转染时不加,之后用常规的
离成功还差一点
7楼2017-09-01 09:50:51
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生物小学弟

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 婷婷贝贝 at 2017-09-01 09:49:30
3000都说不用换不带血清的培养基。但是我们有时候为了转染效率高,细胞还皮实的话,就换不带血清的培养基,转染后8小时换液。

那你们转染的96孔板吗?为什么我换液的时候,会换没好多的细胞呀?

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8楼2017-09-01 10:07:01
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生物小学弟

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yun920228 at 2017-09-01 09:38:26
24h不加双抗,后面换成正常培养基

谢谢

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9楼2017-09-01 10:07:47
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生物小学弟

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 婷婷贝贝 at 2017-09-01 09:49:30
3000都说不用换不带血清的培养基。但是我们有时候为了转染效率高,细胞还皮实的话,就换不带血清的培养基,转染后8小时换液。

请问你们有出现这样的情况吗?

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10楼2017-09-01 10:08:31
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