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zht930528木虫 (正式写手)
麻辣王子
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双荧光素酶报告实验,24孔板,质粒比例及总量,还有miRNA类似物共转染等问题 已有3人参与
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楼主小白一枚,在做双荧光素酶报告实验。 一: 肺癌细胞292,铺的24孔板,铺板前没计数,隔天镜检,细胞密度有点低,应该不到90%左右,可以再等一天转染不? 二:实验载体与海肾荧光素载体的比例多少合适呢?另外miRNA类似物加多少量? 三:DNA的总量是加上miRNA类似物的嘛? 四:DNA总量与lipo2000的比例? 五:铺板用的培养基是含有抗生素的,转染前PBS清洗,这个影响大不大? 转染前需要不需要细胞饥饿处理? 六:24孔板无血清无抗培养基500 uL + 稀释质粒与稀释lipo2000的体积,终体积有多少? 问题比较多,请诸位做过的大神予以指点。 |
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zht930528
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