24小时热门版块排行榜    

查看: 1966  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

红木深衣

捐助贵宾 (小有名气)

[交流] DNA 浓度测定

pcr后切胶回收,测定dna 浓度,如图,出现问题,浓度太低,特征光谱不是260,请大家帮忙分析这是什么情况及可能原因

DNA 浓度测定


DNA 浓度测定-1


发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 红木深衣 at 2017-08-31 13:14:48
乙醇沉淀再纯化一次,操作试剂步骤能说清楚一点吗?原谅入门小白。你是说最后用水洗脱那一步,水温度高一点吗,加到柱子里等几分钟再离心?
...

直接搜索ethanol precipitation 网上有很多protocol。 最后我一般是用qiagen/clonetch的kit里的elution buffer 成分我记得是ph7.5的tris之类的。 溶液加热到70度 放在柱子里5分钟 后再分三次离心 一开始用低速 之后用正常速
8楼2017-08-31 16:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

红木深衣

捐助贵宾 (小有名气)

图一特征光谱是230,图二我就看不懂了

发自小木虫Android客户端
2楼2017-08-30 10:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

llsskk112233

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问楼主用的试剂盒是什么牌子的,柱子是白色的吗?还有你pcr循环多少

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-08-30 22:25:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-31 07:43:55
很正常啊 切胶回收后的盐浓度一般会比较高 可以用乙醇沉淀再纯化一次 另外浓度低也是正常 要想高一点 可以通过提高elution温度和时间来增加回收效率
4楼2017-08-31 05:15:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见