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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 真菌细胞核蛋白提取
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mochenmi

铜虫 (小有名气)

[求助] 真菌细胞核蛋白提取 已有1人参与

实验材料是一种丝状真菌。
想请教一下，如果提取总蛋白，是不是也包括了细胞核的蛋白？如果不行的话，有没有好的提取细胞核蛋白的方法？
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1楼 2017-08-26 22:00:52
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水逝雁南飞

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-28 06:36:27
这救要看你用的裂解液了，如果裂解液里的阴离子去垢剂是SDS，那应该可以破细胞核膜

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2楼2017-08-27 14:32:07
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mochenmi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 水逝雁南飞 at 2017-08-27 14:32:07
这救要看你用的裂解液了，如果裂解液里的阴离子去垢剂是SDS，那应该可以破细胞核膜

用的是碧云天的RIPA，没查到有没有SDS。尴尬…请问你知道什么提取的方法嘛？

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3楼2017-08-27 19:22:51
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水逝雁南飞

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by mochenmi at 2017-08-27 19:22:51
用的是碧云天的RIPA，没查到有没有SDS。尴尬…请问你知道什么提取的方法嘛？
...

我们这里用的是细胞核蛋白提取试剂盒，用RIPA提核蛋白比较麻烦

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4楼2017-08-27 19:45:08
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mochenmi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 水逝雁南飞 at 2017-08-27 19:45:08
我们这里用的是细胞核蛋白提取试剂盒，用RIPA提核蛋白比较麻烦
...

方便告诉我试剂盒的公司和名字吗？

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5楼2017-08-27 19:49:20
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水逝雁南飞

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by mochenmi at 2017-08-27 19:49:20
方便告诉我试剂盒的公司和名字吗？
...

嗯呐，我们用的就是thermo的kit，货号是78833，不知道你能不能用呐

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6楼2017-08-27 19:55:19
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mochenmi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 水逝雁南飞 at 2017-08-27 19:55:19
嗯呐，我们用的就是thermo的kit，货号是78833，不知道你能不能用呐
...

我看了下你说的试剂盒，太贵了老师估计不会同意。
你之前说的含有SDS的裂解液可以自己配吗？有没有配方，谢谢！

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7楼2017-08-28 12:59:42
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水逝雁南飞

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by mochenmi at 2017-08-28 12:59:42
我看了下你说的试剂盒，太贵了老师估计不会同意。
你之前说的含有SDS的裂解液可以自己配吗？有没有配方，谢谢！
...

50mM Tris
150mM NaCl
5mM EDTA
1%SDS
Complete protease Inhibitor

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8楼2017-08-28 13:08:01
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mochenmi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 水逝雁南飞 at 2017-08-28 13:08:01
50mM Tris
150mM NaCl
5mM EDTA
1%SDS
Complete protease Inhibitor
...

多谢！这个裂解出来的就是总蛋白里面会含有核蛋白，对吧？
你是做真菌的嘛？

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9楼2017-08-28 13:10:09
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水逝雁南飞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by mochenmi at 2017-08-28 13:10:09
多谢！这个裂解出来的就是总蛋白里面会含有核蛋白，对吧？
你是做真菌的嘛？
...

呃~我是做癌细胞的呐

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10楼2017-08-28 13:13:13
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