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冉超

新虫 (初入文坛)

[求助] 过离子交换柱 已有2人参与

阴离子交换柱,柱子用的GE的DEAE预装柱,缓冲液用的20mM的tris-hcl和1M的Nacl,PH均为8.0。过柱子的时候先用tris平衡,结果目的蛋白流出来了,后面用Nacl洗脱的时候,没有目的蛋白。

目的蛋白的等电点不清楚,在摸索缓冲液PH 的时候,用PH7的tris-hcl去溶解,几乎不溶。PH8条件下全部溶解。

样品是发酵产物,经硫酸铵沉淀后过GE脱盐柱,冷冻干燥得到的。

图如下,1.2号峰是活性峰,但是没经过氯化钠洗脱,就流出来了。

过离子交换柱
Chart.jpg
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diamond-snow

新虫 (初入文坛)

是不是蛋白溶液中含有盐,导致挂不上柱

发自小木虫Android客户端
9楼2017-09-24 21:45:22
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xiangcx

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品是经过脱盐柱纯化冻干得到的,是不是脱盐的这 一步对后面纯化造成了这个影响啊?
生活不止苟且和金钱,还有自然和远方。
2楼2017-08-26 16:09:20
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姣妹崽

新虫 (小有名气)

检测一下活性峰的纯度,如果纯度能达到要求,就乐了

发自小木虫Android客户端
3楼2017-08-27 18:44:48
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自带光环?

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 姣妹崽 at 2017-08-27 18:44:48
检测一下活性峰的纯度,如果纯度能达到要求,就乐了

肯定不纯。这结果也不能用吧。。。

发自小木虫Android客户端
4楼2017-08-27 20:27:46
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