| 查看: 4153 | 回复: 9 | ||
[求助]
过离子交换柱 已有2人参与
|
|
阴离子交换柱，柱子用的GE的DEAE预装柱，缓冲液用的20mM的tris-hcl和1M的Nacl，PH均为8.0。过柱子的时候先用tris平衡，结果目的蛋白流出来了，后面用Nacl洗脱的时候，没有目的蛋白。 目的蛋白的等电点不清楚，在摸索缓冲液PH 的时候，用PH7的tris-hcl去溶解，几乎不溶。PH8条件下全部溶解。 样品是发酵产物，经硫酸铵沉淀后过GE脱盐柱，冷冻干燥得到的。 图如下，1.2号峰是活性峰，但是没经过氯化钠洗脱，就流出来了。  Chart.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
生物学学硕求调剂
已经有10人回复
-
上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生（材料、化学、电化学，环境）
已经有4人回复
-
材料学求调剂
已经有6人回复
-
303求调剂
已经有5人回复
-
一志愿武理085500机械专业总分300求调剂
已经有7人回复
-
考研调剂
已经有4人回复
-
281求调剂
已经有4人回复
-
0805 316求调剂
已经有6人回复
-
085601求调剂总分293英一数二
已经有3人回复
-
08工学调剂
已经有17人回复
2楼2017-08-26 16:09:20
姣妹崽
新虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 1204.9
- 散金: 150
- 红花: 5
- 帖子: 257
- 在线: 51.6小时
- 虫号: 2681520
- 注册: 2013-09-26
- 专业: 微生物药物
3楼2017-08-27 18:44:48
4楼2017-08-27 20:27:46
5楼2017-08-27 20:28:46
|
有没有大神帮忙解答一下。我今天测了样品的PH,发现我用PH8.0的tris-hcl溶解之后打算上柱的样品，PH是6，我又调到PH8.0，然后上柱，峰形还不如没调之前的，穿透峰变成了一个。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2017-08-27 20:32:20
walking dead
金虫 (小有名气)
填料制备和蛋白纯化专家
- 应助: 40 (小学生)
- 贵宾: 0.001
- 金币: 1354.8
- 散金: 59
- 红花: 17
- 帖子: 287
- 在线: 56.5小时
- 虫号: 4175016
- 注册: 2015-10-26
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
从你的色谱图来看，用阴离子交换柱是直接流穿的，没有挂柱的。考虑你pH8.0缓冲液溶解样品后pH为6.0。用阳离子交换介质SP或CM试试。 发自小木虫Android客户端 |
7楼2017-08-28 07:57:55
张木0000
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1473.5
- 散金: 50
- 红花: 6
- 帖子: 353
- 在线: 78.2小时
- 虫号: 2760285
- 注册: 2013-10-28
- 专业: 太阳和太阳系
8楼2017-09-17 09:39:28
diamond-snow
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 526.5
- 帖子: 35
- 在线: 12.2小时
- 虫号: 3153710
- 注册: 2014-04-21
- 专业: 生物大分子结构与功能
9楼2017-09-24 21:45:22
10楼2017-09-30 22:35:41
