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过离子交换柱 已有2人参与
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阴离子交换柱，柱子用的GE的DEAE预装柱，缓冲液用的20mM的tris-hcl和1M的Nacl，PH均为8.0。过柱子的时候先用tris平衡，结果目的蛋白流出来了，后面用Nacl洗脱的时候，没有目的蛋白。 目的蛋白的等电点不清楚，在摸索缓冲液PH 的时候，用PH7的tris-hcl去溶解，几乎不溶。PH8条件下全部溶解。 样品是发酵产物，经硫酸铵沉淀后过GE脱盐柱，冷冻干燥得到的。 图如下，1.2号峰是活性峰，但是没经过氯化钠洗脱，就流出来了。  Chart.jpg |
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2楼2017-08-26 16:09:20
姣妹崽
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3楼2017-08-27 18:44:48
4楼2017-08-27 20:27:46
5楼2017-08-27 20:28:46
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有没有大神帮忙解答一下。我今天测了样品的PH,发现我用PH8.0的tris-hcl溶解之后打算上柱的样品，PH是6，我又调到PH8.0，然后上柱，峰形还不如没调之前的，穿透峰变成了一个。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2017-08-27 20:32:20
walking dead
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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从你的色谱图来看，用阴离子交换柱是直接流穿的，没有挂柱的。考虑你pH8.0缓冲液溶解样品后pH为6.0。用阳离子交换介质SP或CM试试。 发自小木虫Android客户端 |
7楼2017-08-28 07:57:55
张木0000
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8楼2017-09-17 09:39:28
diamond-snow
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