24小时热门版块排行榜    

查看: 2191  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

萤火一朵227

新虫 (小有名气)

[求助] 杀菌实验对照组溶于PBS的菌急剧下降怎么办 已有3人参与

最近做杀菌实验,把细菌溶于PBS中后做杀菌实验,发现对照组也就是只溶于PBS的细菌数急剧下降,做平板菌落计数死的比实验组还快,我知道细菌洗涤后保存在PBS中死的比较快,但是由于之前做同样的实验对照组在6h内细菌数基本保持不变,查了好多文献也很多把菌悬在PBS中做杀菌实验的,现在处于找不到找不到原因的焦躁状态,本人非生物专业,对此了解不多,有没有哪位大神能指点一二?万分感激!

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

萤火一朵227

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by snoopytbw at 2017-08-22 10:46:36
PBS下的细菌重悬后,不会死的那么快的。肯定是有哪里出了问题!在LB培养后重悬之前,有没有用PBS洗涤下,另外,严重怀疑灭菌物质污染!灭菌粉末,你可以先溶解了,过滤除菌后再用的!方便的话,可以告之是什么灭菌 ...

细菌用LB培养后用PBS离心清洗了三次左右,然后用PBS重溶后,之后倍比稀释到不同梯度后涂板,然后再推算各个稀释梯度对应的菌的浓度(cfu/ml),再把所需浓度的菌液加材料做实验,我的材料是具有杀菌活性的纳米材料,根本溶不了,每次做之前我都是用紫外照后加到菌液中的。因为从将菌从LB中培养到稀释计数再到加材料做实验可能要个几天,所以目前我怀疑是因为菌在PBS中缺乏营养所致,不过又觉得那里有点不对

发自小木虫Android客户端
5楼2017-08-22 11:04:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PBS重悬后,细菌是不会死那么快的。我估计你的PBS被杀菌剂污染了,这是一种可能性。也有可能PBS配置不当,里面的盐发生了微小结晶,细菌会吸附上去,然后沉降,如果用OD值测,就会降了。第三种可能性,你做的PBS对照菌浓度过大,菌体会几个聚集,缓慢沉降,时间越久,OD值越低。

检查下,PBS污染,配方,然后看看文献里面的阴性对照组菌浓度。还有你做的啥菌,能不能用OD值或者麦氏比浊呢?这个显然不是菌死的问题!!
2楼2017-08-22 08:52:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

萤火一朵227

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopytbw at 2017-08-22 08:52:47
PBS重悬后,细菌是不会死那么快的。我估计你的PBS被杀菌剂污染了,这是一种可能性。也有可能PBS配置不当,里面的盐发生了微小结晶,细菌会吸附上去,然后沉降,如果用OD值测,就会降了。第三种可能性,你做的PBS对照 ...

非常感谢您的回复!实验中对照组和实验组的菌都是用PBS溶的(用LB培养后用PBS洗后再重新溶于PBS中),不过实验组加了材料,材料是粉末状的,分散性并不好,用OD测会影响吸光度,所以没用这个方法测。菌试了表皮和金葡,其实实验组的菌死的比对照组的菌是要多的,但是由于对照组就死的很多,因此数据就没有意义了,

发自小木虫Android客户端
3楼2017-08-22 10:29:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 萤火一朵227 at 2017-08-22 10:29:31
非常感谢您的回复!实验中对照组和实验组的菌都是用PBS溶的(用LB培养后用PBS洗后再重新溶于PBS中),不过实验组加了材料,材料是粉末状的,分散性并不好,用OD测会影响吸光度,所以没用这个方法测。菌试了表皮和金 ...

PBS下的细菌重悬后,不会死的那么快的。肯定是有哪里出了问题!在LB培养后重悬之前,有没有用PBS洗涤下,另外,严重怀疑灭菌物质污染!灭菌粉末,你可以先溶解了,过滤除菌后再用的!方便的话,可以告之是什么灭菌物质么

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2017-08-22 10:46:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-30 05:18 by winsaint
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 03:26 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:58 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:58 by ZPa0EcMwuECS
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 01:14 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 01:12 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 00:41 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 面上意见出来了 +8 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 16/800 2026-08-29 20:45 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 9/450 2026-08-29 09:59 by jklily
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
请填处理意见