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目的蛋白将His tag包裹，蛋白不与镍柱结合？急求纯化蛋白的大神指点！ 已有2人参与
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| 如题，载体用peasy-E1，前段带6个His标签，因不挂柱，又在后端加6个His标签，测序正确，能够表达且跑蛋白胶表达量很高，酶活也有，就是过镍住时，结合不上去，目标蛋白在流穿的bunding buffer 中，分析是：His tag被包裹在目的蛋白里，如何解决这个问题？？？得不到高纯度的蛋白，实验被迫中止，急求过镍柱的高手指点！！！ |
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不好意思，上面说的把蛋白当成原核的来处理了。如果是原核表达，你可以参照一下，如果不是你就变性一下，再复性。实在不行你就重新构建到一个新载体中试试。 发自小木虫Android客户端 |
9楼2017-08-07 08:09:59
2楼2017-08-06 16:52:43
3楼2017-08-06 22:40:46
4楼2017-08-06 23:00:22