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目的蛋白将His tag包裹,蛋白不与镍柱结合?急求纯化蛋白的大神指点! 已有2人参与
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| 如题,载体用peasy-E1,前段带6个His标签,因不挂柱,又在后端加6个His标签,测序正确,能够表达且跑蛋白胶表达量很高,酶活也有,就是过镍住时,结合不上去,目标蛋白在流穿的bunding buffer 中,分析是:His tag被包裹在目的蛋白里,如何解决这个问题???得不到高纯度的蛋白,实验被迫中止,急求过镍柱的高手指点!!! |
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