| 查看: 2500 | 回复: 17 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
阳光雨露118新虫 (正式写手)
|
[求助]
目的蛋白将His tag包裹，蛋白不与镍柱结合？急求纯化蛋白的大神指点！ 已有2人参与
|
|
| 如题，载体用peasy-E1，前段带6个His标签，因不挂柱，又在后端加6个His标签，测序正确，能够表达且跑蛋白胶表达量很高，酶活也有，就是过镍住时，结合不上去，目标蛋白在流穿的bunding buffer 中，分析是：His tag被包裹在目的蛋白里，如何解决这个问题？？？得不到高纯度的蛋白，实验被迫中止，急求过镍柱的高手指点！！！ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
周虫虫mini» 猜你喜欢
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有84人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
|
原核表达很多蛋白都会过量表达。蛋白短时间内大量表达而来不及正确折叠，你先把你现有的表达时间缩小一倍看看。如果还不能解决，你只能想办法把把结构打开，再重新折叠。对了，你的蛋白不挂柱，但能溶解吗？有没有沉淀啥的？ 发自小木虫Android客户端 |
8楼2017-08-07 08:01:37
2楼2017-08-06 16:52:43
3楼2017-08-06 22:40:46
阳光雨露118
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1405.1
- 红花: 1
- 帖子: 532
- 在线: 43.5小时
- 虫号: 4483116
- 注册: 2016-03-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2017-08-06 23:00:22