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目的蛋白将His tag包裹，蛋白不与镍柱结合？急求纯化蛋白的大神指点！ 已有2人参与
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| 如题，载体用peasy-E1，前段带6个His标签，因不挂柱，又在后端加6个His标签，测序正确，能够表达且跑蛋白胶表达量很高，酶活也有，就是过镍住时，结合不上去，目标蛋白在流穿的bunding buffer 中，分析是：His tag被包裹在目的蛋白里，如何解决这个问题？？？得不到高纯度的蛋白，实验被迫中止，急求过镍柱的高手指点！！！ |
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原核表达很多蛋白都会过量表达。蛋白短时间内大量表达而来不及正确折叠，你先把你现有的表达时间缩小一倍看看。如果还不能解决，你只能想办法把把结构打开，再重新折叠。对了，你的蛋白不挂柱，但能溶解吗？有没有沉淀啥的？ 发自小木虫Android客户端 |
8楼2017-08-07 08:01:37
2楼2017-08-06 16:52:43
3楼2017-08-06 22:40:46
4楼2017-08-06 23:00:22