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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wzc4884

金虫 (正式写手)

[求助] 急切求助！谢谢！（关于MTT法中，吸光度值的问题） 已有2人参与

急切求助！谢谢！
     求助：最近使用MTT法，做肿瘤细胞活性小分子的筛选，测试中发现：96空板中“空白”（加有培养液和溶剂）的吸光度值在0.6左右，理论上讲，“空白”孔中，没有肿瘤细胞，也不加噻唑兰，就不可能有结晶紫的产生，换句话讲结果就是吸光度值不可能这么大（0.6）。但是，实际上却是是这么大！请教下，到底是什么原因呢？请各位赐教！
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1楼 2017-08-04 17:26:49
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ywwabc

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1、一般MTT空白的吸光值在0.04-0.1之间，你这个偏高要看培养基有没有污染以及你加的药物是不是会影响吸光值，
2、可以找一个空白孔只加DMSO检测吸光值，如果没有问题，就可以排除仪器问题了
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wzc4884
3楼2017-08-17 11:28:18
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wzc4884: 金币+10 2017-10-07 14:46:24
MTT被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan。在特 定的溶剂存在的情况下，可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定 570nm 波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度 越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。

在理想的MTT实验中，如果是细胞抑制实验，不加药物处理的空白组的吸收值应该在0.8-1.2左右，太小检测误差占的比例较多，太大吸收值可能已经超出线性范围。这个原理在朗伯-比尔定律中有解释。
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及时行乐，人生不留遗憾！
2楼2017-08-04 17:51:02
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wzc4884

金虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by ywwabc at 2017-08-17 11:28:18
1、一般MTT空白的吸光值在0.04-0.1之间，你这个偏高要看培养基有没有污染以及你加的药物是不是会影响吸光值，
2、可以找一个空白孔只加DMSO检测吸光值，如果没有问题，就可以排除仪器问题了

非常感谢。
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4楼2017-10-07 14:46:58
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