24小时热门版块排行榜    

查看: 4748  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wuhao4850103

银虫 (著名写手)

[交流] 非变性凝胶电泳蛋白条带分布在浓缩胶与分离胶之间

我最近在跑非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,也就是常说的天然胶,分离胶的浓度是6%,蛋白分子量在15万左右,电泳电压160V,等溴酚蓝指示剂到达凝胶最前沿以后,把胶放在考马斯亮蓝R-250中染色3小时,然后用脱色液脱色,不过最后发现蛋白条带都分布在浓缩胶与分离胶交界的位置,给人感觉好像蛋白条带进入分离胶以后便停止运动了,不知道是什么原因,请大家帮忙分析一下,多谢了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

嘻嘻哈哈
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

puluo-880312

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wuhao4850103: 金币+10 2017-08-06 14:13:40
Native PAGE?由于没有SDS,需要根据样品自身电荷,所以分离胶与浓缩胶的pH很关键!电泳时间相对常规的SDS-PAGE要长。
3楼2017-08-04 08:36:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

wuhao4850103

银虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by puluo-880312 at 2017-08-04 08:36:18
Native PAGE?由于没有SDS,需要根据样品自身电荷,所以分离胶与浓缩胶的pH很关键!电泳时间相对常规的SDS-PAGE要长。

浓缩胶的pH是6.8,分离胶的pH是8.8,
嘻嘻哈哈
4楼2017-08-06 14:15:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

puluo-880312

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wuhao4850103: 金币+10 2017-10-17 15:28:32
引用回帖:
4楼: Originally posted by wuhao4850103 at 2017-08-06 14:15:09
浓缩胶的pH是6.8,分离胶的pH是8.8,...

样品的pI是多少?根据样品的pI要改变浓缩胶和分离胶的pH的,对酸性蛋白来说该pH没问题;此时常用的Marker没有确切意义了,做native PAGE通常需要相对较纯的样品,来判断样品是否有不同的构象等
5楼2017-08-07 16:28:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhao4850103

银虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by puluo-880312 at 2017-08-07 16:28:09
样品的pI是多少?根据样品的pI要改变浓缩胶和分离胶的pH的,对酸性蛋白来说该pH没问题;此时常用的Marker没有确切意义了,做native PAGE通常需要相对较纯的样品,来判断样品是否有不同的构象等...

是酸性蛋白,分子量在150KDa左右,

发自小木虫Android客户端
嘻嘻哈哈
6楼2017-08-09 00:10:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 340求调剂 +4 话梅糖111 2026-03-24 4/200 2026-03-24 21:41 by yuyu98412
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 086003食品工程求调剂 +5 淼淼111 2026-03-24 5/250 2026-03-24 20:53 by lailaisimei
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 303求调剂 +4 元夕元 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:00 by macy2011
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 10/500 2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
请填处理意见