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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 电泳拖带的问题
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_zhangyyy123

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳拖带的问题 已有1人参与

之前做了一扩，结果不理想，有座了二扩，直接拿的一扩产物做的模板，结果条带和一扩的差不多。后来想着是不是模板浓度太高，又把它给稀释了一下（一扩产物），第一次是用稀释20倍的产物做的模板，有一点条带，退火温度55℃左右，第二次就稀释了50--100倍，用这些模板再做了一次pcr，结果发现拖带的情况很严重，我想问下各位这种情况除了是dna发生了降解，还有可能是什么原因呢？求各位大神解答，拜托了，这个实验就因为这个电泳的问题拖了很久了，希望能给很快给解决了！
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1楼 2017-07-25 17:21:40
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-26 07:45:43
你要看看模板DNA有没有蛋白污染。从质粒里面扩增还是基因组DNA？后者因为不存，而且提取过程中容易混入蛋白污染，有时候会出现类似的情况。
祝顺利。
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
2楼2017-07-25 17:41:35
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_zhangyyy123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wangranjun at 2017-07-25 17:41:35
你要看看模板DNA有没有蛋白污染。从质粒里面扩增还是基因组DNA？后者因为不存，而且提取过程中容易混入蛋白污染，有时候会出现类似的情况。
祝顺利。

确实是提取的基因组DNA，但是昨天用稀释了20倍的样品做模板却没有出现这种情况，我觉得应该不是蛋白污染
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3楼2017-07-25 19:38:59
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