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w1angp2eng金虫 (小有名气)
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PCR反应内参CT值差异很大,如何理解 已有4人参与
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| 初次做PCR,将反转录RNA浓度统一调整到900ng(20μl体系)后, 即45ng/μl。然后按照程序进行荧光定量PCR,但是在实际中,内参基因(β-actin)的CT值范围从16-21不等。主要疑问有两个,第一,内参CT值范围多大合适,是一致才可靠吗?第二,目的基因CT值,在实际测定中空白的CT值大约在30左右,那是否意味着目的基因大于30就没有太大意义,只是表明其表达量很低? |
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