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chenziping

金虫 (小有名气)

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[求助] 克隆基因7000多bp PCR扩不出来有什么好办法酶已有3人参与

克隆基因7000多bp PCR扩不出来有什么好办法酶

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1楼 2017-07-14 23:42:37

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PattyGao

新虫 (小有名气)

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专业: 基因表达调控与表观遗传学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

可以用融合pcr的方式来扩，就是把整个片段分成两段，中间设置引物成overleap区，分别扩出两个片段，再进行融合

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7楼2017-07-17 14:13:11

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zhouxfd

木虫 (正式写手)

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专业: 微生物生理与生物化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

用Gibson 扩两个3.5K的就行了

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2楼2017-07-15 00:17:15

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cry_2013

木虫 (正式写手)

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专业: 兽医传染病学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

可以分片段扩出来，选用适当的酶切位点，拼接到一块。

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3楼2017-07-15 11:14:04

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biofeng

银虫 (初入文坛)

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专业: 原子和分子物理

可以考虑gibson assembly

发自小木虫IOS客户端

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4楼2017-07-15 11:51:09

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