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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 克隆基因7000多bp PCR扩不出来 有什么好办法酶
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chenziping

金虫 (小有名气)

[求助] 克隆基因7000多bp PCR扩不出来 有什么好办法酶 已有3人参与

克隆基因7000多bp PCR扩不出来 有什么好办法酶
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1楼 2017-07-14 23:42:37
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用Gibson 扩两个3.5K的就行了
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2楼2017-07-15 00:17:15
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cry_2013

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以分片段扩出来，选用适当的酶切位点，拼接到一块。
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3楼2017-07-15 11:14:04
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biofeng

银虫 (初入文坛)
可以考虑gibson assembly

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4楼2017-07-15 11:51:09
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邢曙光

木虫 (小有名气)
延伸时间看看够不够，还有就是保证模版没有问题，模版错了怎么也披不出来

发自小木虫IOS客户端
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5楼2017-07-15 12:41:20
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mayunhui

新虫 (正式写手)
用步移试剂盒试试
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书到用时方恨少
6楼2017-07-17 09:22:26
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PattyGao

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以用融合pcr的方式来扩，就是把整个片段分成两段，中间设置引物成overleap区，分别扩出两个片段，再进行融合
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7楼2017-07-17 14:13:11
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