24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1100  |  回复: 9

18693104857

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶切 已有2人参与

单酶切切完后为什么载体比空载体还要小呢?求助左边两个是空质粒,右边是单酶切

酶切


发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有可能因为你的载体上有两个该酶的位点,但切下来的片段大小恰好一致
2楼2017-07-14 06:02:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengshen2005

银虫 (正式写手)

你的载体大小与初始版本的大小是否一致

发自小木虫Android客户端
3楼2017-07-14 06:36:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dgm1208

银虫 (小有名气)

你质粒大小是多少?讲道理单酶切后跑胶大小和质粒真实大小一致 如果你这个单酶切的大小和原质粒大小一至 就说明你空质粒提的有问题 如果单酶切和原质粒大小不一致说明酶切有问题

发自小木虫IOS客户端
科研路艰辛···
4楼2017-07-14 09:11:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dgm1208

银虫 (小有名气)

科研路艰辛···
5楼2017-07-14 09:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

贱贱JMe

木虫 (小有名气)

教导主任

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不要纠结这个结果了,好好检查你的方案和数据,此次实验肯定是存在问题的。
如果使用相同的酶切位点插入目的片段,那么在酶切回收载体时就可以看到单切之后载体的大小。然后插入片段之后又用这个酶单切,可能因为插入的关系引入新的位点,造成双酶切而且片段大小无法分辨开来重合在一起显示为一条带。
重新选择单酶切位点,酶切验证构建好的质粒看结果是否符合预期结果。
想做一位科研好人
6楼2017-07-14 10:47:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18693104857

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fengshen2005 at 2017-07-14 06:36:52
你的载体大小与初始版本的大小是否一致

空载体大小一止呢

发自小木虫Android客户端
7楼2017-07-16 07:51:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18693104857

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fengshen2005 at 2017-07-14 06:36:52
你的载体大小与初始版本的大小是否一致

空载体一致呢

发自小木虫Android客户端
8楼2017-07-16 07:54:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18693104857

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-14 06:02:05
有可能因为你的载体上有两个该酶的位点,但切下来的片段大小恰好一致

我把空载体也用单酶切和双酶切都切了,跑出来大小跟空载体一样,说明载体上没有这两个酶的酶切位点。现在重组载体单酶切后变小了,重组载体双酶切后目的基因在目的位置,就是切开的质粒不在相应的位置上,分子量变小了

发自小木虫Android客户端
9楼2017-07-16 07:57:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

於怀龙

新虫 (小有名气)


现在有无缝克隆,不用酶切,单片段插入阳性率100%-三片段同时插入阳性率70%一次完成

发自小木虫Android客户端
10楼2017-07-16 08:58:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 18693104857 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085601一志愿西北工业大学初试346 +4 085601初试346 2026-03-30 4/200 2026-03-31 07:47 by jp9609
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +5 小张zxy张 2026-03-26 10/500 2026-03-31 00:29 by jp9609
[考研] 理学07化学 303求调剂 +4 睿08 2026-03-27 4/200 2026-03-30 23:29 by yujianx
[考研] 各位老师好,我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕 +10 Koxui 2026-03-28 10/500 2026-03-30 19:33 by 源_2020
[考研] 324求调剂 +9 hanamiko 2026-03-26 11/550 2026-03-30 14:27 by JourneyLucky
[考研] 求化学调剂 +11 wulanna 2026-03-28 11/550 2026-03-30 10:59 by 探123
[考研] 318求调剂 +7 陈晨79 2026-03-30 7/350 2026-03-30 10:49 by 探123
[考研] 一志愿211,335分,0856,求调剂院校和导师 +7 倾____萧 2026-03-27 8/400 2026-03-30 09:37 by longlotian
[考研] 调剂310 +12 温柔的晚安 2026-03-25 13/650 2026-03-29 20:01 by 无际的草原
[考研] 349求调剂 +6 李木子啊哈哈 2026-03-25 6/300 2026-03-29 12:47 by 无际的草原
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 化学调剂 +4 爱吃番茄的旭 2026-03-24 5/250 2026-03-27 17:50 by kiokin
[考研] 279 分 求调剂 +4 睡个好觉_16 2026-03-24 4/200 2026-03-27 15:05 by 醉在风里
[考研] 085600,材料与化工321分,求调剂 +9 大馋小子 2026-03-27 9/450 2026-03-27 14:30 by mmm just
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[考研] 机械学硕310分,数一英一,一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
信息提示
请填处理意见