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新虫 (初入文坛)

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[求助] 酶切已有2人参与

单酶切切完后为什么载体比空载体还要小呢？求助左边两个是空质粒，右边是单酶切

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1楼 2017-07-13 19:09:16

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贱贱JMe

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

不要纠结这个结果了，好好检查你的方案和数据，此次实验肯定是存在问题的。
如果使用相同的酶切位点插入目的片段，那么在酶切回收载体时就可以看到单切之后载体的大小。然后插入片段之后又用这个酶单切，可能因为插入的关系引入新的位点，造成双酶切而且片段大小无法分辨开来重合在一起显示为一条带。
重新选择单酶切位点，酶切验证构建好的质粒看结果是否符合预期结果。