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Z&D铁虫 (小有名气)
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拟南芥EMS突变体 已有1人参与
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| 大家好，导师要求做拟南芥EMS突变体，但我不知如何下手，具体的流程是什么尼？还请各位多多指教，小女子感激不尽！！ |
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fengshen2005
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2楼2017-07-11 06:28:34
【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
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1、EMS诱变拟南芥 诱变方法： 称取250mg(约5000粒)野生型种子+25ml重蒸水 →50ml烧杯内搅拌30min→4℃下放置12h→30ml 100mmol/L磷酸缓冲液(pH6.5)的100ml三角瓶中 →加入0.2%(v/v)的甲基磺酸乙酯(EMS)→封口后 放在水浴(25℃)振荡器上振荡12h→50ml蒸馏水 漂洗种子4次,每次15min→将漂洗好的种子置4℃ 下春化3天后种植。 2、 诱变植株培养： 将经EMS诱变处理后的拟南芥种子(M1)播 种于用1 /4Hoagland营养液浸透的混有蛭石 的营养土中(营养土:蛭石=2:1, v/v),种植后 覆盖塑料薄膜以保持湿度。 3、 突变体筛选： 根据光合色素的改变来筛选叶色突变体 因为很多与光合作用相关的基因突变,会直接引 起叶片颜色的改变。叶色变异是比较常见的突 变性状,一般在苗期表达,但少数突变体直到发 育后期才发生叶色突变。由于基因突变往往是 直接或间接影响叶绿素的合成和降解,改变叶绿 素含量和叶绿素a/b的比值,所以叶色突变体也 多为叶绿素突变体。叶色突变体的分类主要从 苗期叶色来划分,如白化、黄化、浅色、黄绿、 绿色、花斑叶。 |
3楼2017-07-11 08:19:21
4楼2017-07-19 17:57:56
Z&D
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5楼2017-09-02 15:26:34
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6楼2017-09-02 15:26:46
